การตรวจสอบเชื้อแบคทีเรีย Vibrio harveyi, V. parahaemolyticus และ V. vulnificusในหอยทะเลโดยวิธี Multiplex PCR

Abstract

การตรวจหาเชื้อแบคทีเรีย Vibrio สปีชีส์สามชนิดที่ก่อโรคในระบบทางเดินอาหารของ มนุษย์และก่อโรคในสัตว์น้ําทะเล โดยการคัดแยกและจําแนกเชื้อแบคทีเรียจากการสุ่มซื้อหอยทะเล ได้แก่ หอยแครง หอยลาย และหอยแมลงภู่ จํานวนทั้งหมด 150 ตัวอย่าง (หอยแครง 50 ตัวอย่าง, หอยลาย 50 ตัวอย่าง และหอยแมลงภู่ 50 ตัวอย่าง) จาก 5 ตลาดสดในเขตกรุงเทพมหานคร เพื่อ เปรียบเทียบการตรวจสอบการจําแนกเชื้อด้วยวิธี Multiplex PCR กับวิธีมาตรฐาน(Biochemical conventional method) การทํา Multiplex PCR โดยใช้ไพรเมอร์ 3 คู่ของยีนที่จําเพาะต่อเชื้อ แบคทีเรียในกลุ่มVibrioสามชนิด ได้แก่ยีนtlhของ V.parahaemolyticus(450 bp), ยีนrpoSของ V.vulnificus(273 bp) และยีนvhhP2ของ V.harveyi(157 bp) จากผลการศึกษาพบว่า ไพรเมอร์ ทั้ง 3 คู่มีความจําเพาะสูง และผลระหว่างวิธี Multiplex PCR กับวิธีมาตรฐาน พบว่าสามารถ ตรวจสอบได้ไม่แตกต่างกันแต่ประสิทธิภาพความถูกต้องแม่นยําและความจําเพาะของวิธี Multiplex PCR มีค่าสูงกว่าวิธีมาตรฐานโดยเปอร์เซ็นต์ Accuracy ของทั้งสองวิธีมีค่า 96% และ 91.67% ตามลําดับ ส่วน Specificity มีค่า 100% และ 100% ตามลําดับ ดังนั้นการนําวิธี Multiplex PCR ไปประยุกต์ใช้ในการตรวจสอบจําแนกเชื้อแบคทีเรียดังกล่าวเป็นวิธีที่มีความสะดวกทราบผลได้อย่าง รวดเร็ว เพื่อควบคุมและป้องกันการแพร่ระบาดทั้งโรคติดเชื้อในสัตว์น้ํารวมทั้งการป้องกันติดต่อโรค ติดเชื้อทางเดินอาหารจากการบริโภคอาหารทะเลได้อีกด้วย